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本试剂盒采用Schumm法，主要用于检测血清或血浆样本，亦可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液等中的高铁血红蛋白还原率。

在有足够的NADPH存在下，高铁血红蛋白能被高铁血红蛋白还原酶还原成亚铁血红蛋白，当红细胞内葡萄糖-6-磷酸脱氢酶含量正常时，由磷酸戊糖代谢途径生成的NADPH的数量足以完成上述还原反应当红细胞内G6PD含量不足或缺乏时，高铁血红蛋白还原速度减慢，甚至不能还原，高铁血红蛋白呈褐色，用分光光度计在635nm波长处检测。

• 红细胞比容低于30%时，高铁血红蛋白还原率显著下降，需调整红细胞与血浆的比例。
  
• 样本不应有凝血或溶血，以免影响测定。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。

• 取新鲜静脉血0.9mL，加入Hb抗凝剂0.1mL，充分混匀。低速离心15min，取出，调整血细胞与血浆比例为1:1后再混匀。取抗凝血，按下表操作：
  

  加入物(μL)	对照管	测定管
  抗凝血	200	200
  Hb Assay Buffer	－	10
  Hb显色液	10	10
  颠倒混匀15次，使与氧气充分接触，加塞或密封后放置于37℃水浴锅或恒温箱中孵育3h。
  取上述反应液	3	3
  G6PD Buffer	300	300

  
  
• 混匀，室温放置2min，用酶标仪635nm处测定对照管、测定管吸光度，分别命名为S_A和B。
  
• 向对照管加入Hb Assay Buffer 0.3μL，混匀，室温放置5min，用酶标仪635nm处再次测定对照管吸光度命名为S_T。